ขั้นตอนการเจาะเก็บไข่ (Ovum Pick-Up: OPU) และการเตรียมสเปิร์มถือเป็นหัวต่อสำคัญของการรักษาด้วยวิธี IVF/ICSI โดยเป็นกระบวนการที่นำเซลล์สืบพันธุ์ของทั้งฝ่ายหญิงและฝ่ายชายเข้ามาสู่ห้องปฏิบัติการเลี้ยงตัวอ่อน (Embryology Laboratory) ในวันเดียวกัน เพื่อเตรียมความพร้อมสำหรับการปฏิสนธิ
การเจาะเก็บไข่เป็นหัตถการทางนรีเวชขนาดเล็ก (Minor Surgery) ที่ใช้เครื่องUltrasound เพื่อดูดเก็บเซลล์ไข่จากรังไข่ทั้งสองข้างผ่านทางผนังช่องคลอด
ภาพไข่เก็บได้แต่ละระยะ
Oocyte (Cumulus-Oocyte Complex: COC) หลังจากเก็บไข่ OPU
Oocytes Metaphase II ไข่สุก ที่พร้อมปฏิสนธิ
Oocytes Metaphase I ไข่ที่ไม่สุก ยังไม่พร้อมที่ปฏิสนธิ
Oocytes Germinal vesicle ไข่ที่ไม่สุก ยังไม่พร้อมที่ปฏิสนธิ
ในวันเดียวกับที่ฝ่ายหญิงเจาะเก็บไข่ ฝ่ายชายจะต้องเข้ามาเก็บน้ำอสุจิเพื่อนำมาคัดแยกเฉพาะอสุจิสำหรับทำการปฏิสนธิ