หลังจากผ่านขั้นตอนการปฏิสนธิในห้องปฏิบัติการ (IVF/ICSI) แล้ว ไข่ที่ได้รับการผสมกับสเปิร์มจะเข้าสู่ "กระบวนการเพาะเลี้ยงตัวอ่อน" ภายในตู้เพาะเลี้ยงพิเศษที่ควบคุมอุณหภูมิ ก๊าซ และความชื้นให้เลียนแบบสภาวะภายในท่อนำไข่และโพรงมดลูกของฝ่ายหญิงอย่างใกล้ชิด
นักวิทยาศาสตร์เลี้ยงตัวอ่อน (Embryologist) จะทำการเฝ้าติดตามพัฒนาการและประเมินเกรดความสมบูรณ์ของตัวอ่อนอย่างละเอียดตั้งแต่วันที่ 1 ถึงวันที่ 6 เพื่อคัดเลือกตัวอ่อนที่มีศักยภาพสูงสุดสำหรับย้ายกลับเข้าสู่โพรงมดลูก หรือนำไปแช่แข็งและส่งตรวจพันธุกรรมต่อไป
เฝ้าติดตามพัฒนาการและประเมินเกรดความสมบูรณ์ของตัวอ่อนในห้องปฏิบัติการเลี้ยงตัวอ่อน
นำไข่ที่เจาะเก็บได้มาปฏิสนธิกับอสุจิที่คัดสรรแล้วด้วยวิธี IVF หรือ ICSI ในห้องปฏิบัติการ จากนั้นนำเข้าเก็บในตู้เพาะเลี้ยงตัวอ่อนระบบปิดควบคุมสภาวะธรรมชาติ
ภาพ: ระยะปฏิสนธิ (ICSI)
หลังผ่านไป 16–18 ชั่วโมง ส่องกล้องประเมินนิวเคลียสการปฏิสนธิ (Pronuclei: PN)
ภาพ: ตัวอ่อน 2PN (ปกติ)
ตัวอ่อนเริ่มแบ่งตัวแบบทวีคูณอย่างต่อเนื่อง
ภาพ: ระยะแบ่งเซลล์ (8 Cells)
ตัวอ่อนแบ่งตัวเกิน 16 เซลล์ และเกิดกระบวนการ Compaction อัดแน่นรวมตัวเป็นก้อนคล้ายผลหม่อน (Mulberry) ก่อนขยายตัวเป็นบลาสโตซิสต์
ภาพ: ระยะโมรูลา (Morula)
ระยะมาตรฐาน มีเซลล์มากกว่า 100 เซลล์ แยกโครงสร้างตัวเด็ก (ICM) และรก (TE) ชัดเจน พร้อมสำหรับการฝังตัวหรือเจาะตรวจโครโมโซม PGT-A
ภาพ: ระยะบลาสโตซิสต์
การประเมินเกรดตัวอ่อนเป็นเพียงเครื่องมือชี้วัด "ลักษณะทางกายภาพและความแข็งแรงในการเจริญเติบโต" ของตัวอ่อนในห้องแล็บ ไม่ใช่การระบุระดับสติปัญญาหรือความสมบูรณ์ของเด็กที่จะเกิดมา
ประเมินจาก 3 ปัจจัยหลัก คือ จำนวนเซลล์, ขนาดของเซลล์ และปริมาณเศษเซลล์หลุดลอย (Fragmentation):
| เกรดตัวอ่อน (Day 3) | ลักษณะทางกายภาพ | ปริมาณ Fragmentation |
|---|---|---|
| Grade A (ดีมาก) | จำนวน 6–8 เซลล์, ขนาดเซลล์เท่ากันสม่ำเสมอ | น้อยกว่า 10% หรือไม่มีเลย |
| Grade B (ดี) | จำนวน 6–8 เซลล์, ขนาดเซลล์อาจแตกต่างกันเล็กน้อย | 10% – 20% |
| Grade C (ปานกลาง) | จำนวนเซลล์น้อยหรือมากกว่าปกติ, ขนาดไม่เท่ากัน | 20% – 50% |
| Grade D (ต่ำ) | เซลล์ไม่ค่อยแบ่งตัว, รูปร่างไม่สมบูรณ์ | มากกว่า 50% ขึ้นไป |
การประเมินเกรดตัวอ่อนระยะ Day 3
พิจารณาจาก จำนวนเซลล์ (ควรมี 6-8 เซลล์ในวันที่ 3), ความเท่ากันของขนาดเซลล์ (Blastomere) และ ปริมาณเศษเซลล์หลุดร่วง (Fragmentation)
ในระยะบลาสโตซิสต์ ทางระบบสากลจะนิยมใช้เกณฑ์การประเมินตาม Gardner Schooling System ซึ่งประกอบด้วย ตัวเลข 1 ตัว + ตัวอักษร 2 ตัว (เช่น 4AA, 4AB, 3BB)
กลุ่มเซลล์แน่น อัดแน่นเป็นก้อนชัดเจน จำนวนเซลล์มาก
กลุ่มเซลล์จับตัวกันเกาะกลุ่ม แต่ไม่แน่นเท่า A จำนวนปานกลาง
กลุ่มเซลล์มีจำนวนน้อย หลวมๆ กระจัดกระจาย ไม่เกาะกลุ่ม
เซลล์ชั้นนอกเรียงตัวสวยงาม อัดแน่นสม่ำเสมอ จำนวนมาก
เซลล์ชั้นนอกเรียงตัวกระจายตัว เรียงกันปานกลาง
เซลล์ชั้นนอกมีจำนวนน้อย ขนาดใหญ่กระจัดกระจาย ไม่เป็นระเบียบ