ขั้นตอนที่ 4: การเพาะเลี้ยงและประเมินเกรดตัวอ่อน (Embryo Culture: Day 1 - Day 6)

หลังจากผ่านขั้นตอนการปฏิสนธิในห้องปฏิบัติการ (IVF/ICSI) แล้ว ไข่ที่ได้รับการผสมกับสเปิร์มจะเข้าสู่ "กระบวนการเพาะเลี้ยงตัวอ่อน" ภายในตู้เพาะเลี้ยงพิเศษที่ควบคุมอุณหภูมิ ก๊าซ และความชื้นให้เลียนแบบสภาวะภายในท่อนำไข่และโพรงมดลูกของฝ่ายหญิงอย่างใกล้ชิด


นักวิทยาศาสตร์เลี้ยงตัวอ่อน (Embryologist) จะทำการเฝ้าติดตามพัฒนาการและประเมินเกรดความสมบูรณ์ของตัวอ่อนอย่างละเอียดตั้งแต่วันที่ 1 ถึงวันที่ 6 เพื่อคัดเลือกตัวอ่อนที่มีศักยภาพสูงสุดสำหรับย้ายกลับเข้าสู่โพรงมดลูก หรือนำไปแช่แข็งและส่งตรวจพันธุกรรมต่อไป

Timeline การเจริญเติบโตของตัวอ่อนรายวัน (Day-by-Day Development)

Embryo Development Pathway

Timeline การเจริญเติบโตของตัวอ่อนรายวัน (Day 0 - Day 6)

เฝ้าติดตามพัฒนาการและประเมินเกรดความสมบูรณ์ของตัวอ่อนในห้องปฏิบัติการเลี้ยงตัวอ่อน

0

Day 0: การปฏิสนธิ (IVF / ICSI)

Fertilization Day

นำไข่ที่เจาะเก็บได้มาปฏิสนธิกับอสุจิที่คัดสรรแล้วด้วยวิธี IVF หรือ ICSI ในห้องปฏิบัติการ จากนั้นนำเข้าเก็บในตู้เพาะเลี้ยงตัวอ่อนระบบปิดควบคุมสภาวะธรรมชาติ

ภาพการทำ ICSI ปฏิสนธิไข่ ภาพ: ระยะปฏิสนธิ (ICSI)
1

Day 1: ตรวจประเมินการปฏิสนธิ (2PN Check)

Fertilization Check

หลังผ่านไป 16–18 ชั่วโมง ส่องกล้องประเมินนิวเคลียสการปฏิสนธิ (Pronuclei: PN)

• ตัวอ่อนปกติ (2PN): มี 2 นิวเคลียส (ไข่ 1PN + อสุจิ 1PN)
• ผิดปกติ (1PN/3PN): ปฏิสนธิไม่สมบูรณ์ จะถูกคัดแยกออก
ภาพ: ตัวอ่อน 2PN (ปกติ)
2-3

Day 2 – Day 3: ระยะแบ่งเซลล์ (Cleavage Stage)

6–8 Cells Standard

ตัวอ่อนเริ่มแบ่งตัวแบบทวีคูณอย่างต่อเนื่อง

  • Day 2: ตัวอ่อนมีจำนวน 2–4 เซลล์
  • Day 3: ตัวอ่อนสมบูรณ์มีจำนวน 6–8 เซลล์
ตัวอ่อนระยะ 8 เซลล์ Day 3 ภาพ: ระยะแบ่งเซลล์ (8 Cells)
4

Day 4: ระยะโมรูลา (Morula Stage)

Compaction Phase

ตัวอ่อนแบ่งตัวเกิน 16 เซลล์ และเกิดกระบวนการ Compaction อัดแน่นรวมตัวเป็นก้อนคล้ายผลหม่อน (Mulberry) ก่อนขยายตัวเป็นบลาสโตซิสต์

ตัวอ่อนระยะโมรูลา Day 4 ภาพ: ระยะโมรูลา (Morula)
5-6

Day 5 – Day 6: ระยะบลาสโตซิสต์ (Blastocyst)

Gold Standard

ระยะมาตรฐาน มีเซลล์มากกว่า 100 เซลล์ แยกโครงสร้างตัวเด็ก (ICM) และรก (TE) ชัดเจน พร้อมสำหรับการฝังตัวหรือเจาะตรวจโครโมโซม PGT-A

ตัวอ่อนระยะบลาสโตซิสต์ Day 5-6 ภาพ: ระยะบลาสโตซิสต์

ไขข้อข้องใจ: วิธีอ่านเกรดตัวอ่อน (Embryo Grading System)

การประเมินเกรดตัวอ่อนเป็นเพียงเครื่องมือชี้วัด "ลักษณะทางกายภาพและความแข็งแรงในการเจริญเติบโต" ของตัวอ่อนในห้องแล็บ ไม่ใช่การระบุระดับสติปัญญาหรือความสมบูรณ์ของเด็กที่จะเกิดมา

1. การประเมินเกรดตัวอ่อนระยะ Day 3 (Cleavage Stage)

ประเมินจาก 3 ปัจจัยหลัก คือ จำนวนเซลล์, ขนาดของเซลล์ และปริมาณเศษเซลล์หลุดลอย (Fragmentation):

เกรดตัวอ่อน (Day 3) ลักษณะทางกายภาพ ปริมาณ Fragmentation
Grade A (ดีมาก) จำนวน 6–8 เซลล์, ขนาดเซลล์เท่ากันสม่ำเสมอ น้อยกว่า 10% หรือไม่มีเลย
Grade B (ดี) จำนวน 6–8 เซลล์, ขนาดเซลล์อาจแตกต่างกันเล็กน้อย 10% – 20%
Grade C (ปานกลาง) จำนวนเซลล์น้อยหรือมากกว่าปกติ, ขนาดไม่เท่ากัน 20% – 50%
Grade D (ต่ำ) เซลล์ไม่ค่อยแบ่งตัว, รูปร่างไม่สมบูรณ์ มากกว่า 50% ขึ้นไป

การประเมินเกรดตัวอ่อนระยะ Day 3

Day 2 - Day 3 Embryo

เกณฑ์การประเมินตัวอ่อนระยะ Cleavage (ระยะแบ่งเซลล์)

พิจารณาจาก จำนวนเซลล์ (ควรมี 6-8 เซลล์ในวันที่ 3), ความเท่ากันของขนาดเซลล์ (Blastomere) และ ปริมาณเศษเซลล์หลุดร่วง (Fragmentation)

Grade A (เกรดดีมาก)
  • ขนาดเซลล์: เท่ากันสม่ำเสมอทุกเซลล์
  • เศษเซลล์ (Fragmentation): แทบไม่มีเลย (0 - 5%)
  • อัตราการเจริญเติบโต: ตามเกณฑ์สมบูรณ์
Grade B (เกรดดี / ปานกลาง)
  • ขนาดเซลล์: แตกต่างกันเล็กน้อย
  • เศษเซลล์ (Fragmentation): ปริมาณเล็กน้อย (10 - 20%)
  • อัตราการเจริญเติบโต: อยู่ในเกณฑ์ดี
Grade C (เกรดพอใช้)
  • ขนาดเซลล์: ขนาดแตกต่างกันชัดเจน / ไม่สม่ำเสมอ
  • เศษเซลล์ (Fragmentation): ปริมาณมาก (> 25 - 50%)
  • อัตราการเจริญเติบโต: เติบโตช้ากว่าเกณฑ์มาตรฐาน

📌 คำศัพท์น่ารู้สำหรับระยะ Cleavage (Day 2 - Day 3)

Blastomere (บลาสโตเมียร์):
เซลล์แต่ละเซลล์ที่เกิดจากการแบ่งตัวของไข่ที่ได้รับการผสมแล้ว
Fragmentation (เศษเซลล์):
ชิ้นส่วนไซโทพลาซึมขนาดเล็กที่หลุดร่วงออกมา ยิ่งมีน้อยยิ่งดี

2. การประเมินเกรดตัวอ่อนระยะ Day 5 - Day 6 (Blastocyst Stage)

ในระยะบลาสโตซิสต์ ทางระบบสากลจะนิยมใช้เกณฑ์การประเมินตาม Gardner Schooling System ซึ่งประกอบด้วย ตัวเลข 1 ตัว + ตัวอักษร 2 ตัว (เช่น 4AA, 4AB, 3BB)

Blastocyst Structure

โครงสร้างตัวอ่อนระยะ Blastocyst

Blastocele (ช่องของเหลว) Trophoblast (TE) (เซลล์ที่จะเติบโตเป็นรก) Zona pellucida (เปลือกไข่หุ้มตัวอ่อน) Inner cell mass (ICM) (ก้อนเซลล์ที่จะเติบโตเป็นทารก)
ICM: ตัวเด็ก Trophoblast (TE): ผนังรก Zona: เปลือกหุ้ม

ระดับการฟักตัวและการขยายขนาด (Expansion Stage 1 - 6)

Level 1
Early Blastocyst
ช่องของเหลวขนาดเล็ก
Level 2
Blastocyst
ช่องของเหลวขยายเกินครึ่ง
Level 3
Full Blastocyst
ขยายเต็มฟอง เปลือกเริ่มบาง
Level 4
Expanded
ขยายใหญ่ เปลือกบางลงชัดเจน
Level 5
Hatching
เริ่มดันตัวฟักออกจากเปลือก (เลข 8)
Level 6
Hatched
ฟักออกจากเปลือกสมบูรณ์
👶

เกรดตัวเด็ก (Inner Cell Mass - ICM)

A
Grade A: คุณภาพดีที่สุด

กลุ่มเซลล์แน่น อัดแน่นเป็นก้อนชัดเจน จำนวนเซลล์มาก

B
Grade B: ระดับดี

กลุ่มเซลล์จับตัวกันเกาะกลุ่ม แต่ไม่แน่นเท่า A จำนวนปานกลาง

C
Grade C: ระดับปานกลาง

กลุ่มเซลล์มีจำนวนน้อย หลวมๆ กระจัดกระจาย ไม่เกาะกลุ่ม

🛡️

เกรดรก (Trophectoderm - TE)

A
Grade A: คุณภาพดีที่สุด

เซลล์ชั้นนอกเรียงตัวสวยงาม อัดแน่นสม่ำเสมอ จำนวนมาก

B
Grade B: ระดับดี

เซลล์ชั้นนอกเรียงตัวกระจายตัว เรียงกันปานกลาง

C
Grade C: ระดับปานกลาง

เซลล์ชั้นนอกมีจำนวนน้อย ขนาดใหญ่กระจัดกระจาย ไม่เป็นระเบียบ

3. ข้อเท็จจริงสำคัญเรื่อง "เกรดตัวอ่อน" ที่คนไข้ควรรู้

  1. เกรดตัวอ่อนไม่ได้การันตีโครโมโซม: ตัวอ่อนเกรดสวยงามระดับ 4AA อาจมีความผิดปกติทางจำนวนโครโมโซม (Aneuploid) ได้ ในขณะที่ตัวอ่อนเกรด 3BB อาจมีโครโมโซมที่ปกติสมบูรณ์ (Euploid) ดังนั้นการตรวจคัดกรองโครโมโซม PGT-A จึงเป็นเทคโนโลยีเสริมที่ช่วยเพิ่มความแม่นยำ
  2. ตัวอ่อนเกรด B หรือ C ก็สามารถกำเนิดเป็นทารกที่สมบูรณ์แข็งแรงได้: เกรดตัวอ่อนเป็นเพียงการประเมินรูปร่างภายนอกผ่านกล้องจุลทรรศน์ ตัวอ่อนเกรดปานกลางหลายๆ ตัวมีอัตราการฝังตัวและคลอดเป็นทารกที่เฉลียวฉลาดและแข็งแรงได้ไม่ต่างจากเกรด A
  3. การเลี้ยงตัวอ่อนถึง Day 5-6 ช่วยคัดกรองธรรมชาติ: ตัวอ่อนที่ไม่แข็งแรงทางพันธุกรรมมักจะหยุดการเจริญเติบโตไปเองในช่วง Day 3 ถึง Day 4 ดังนั้น ตัวอ่อนที่สามารถพัฒนามาจนถึงระยะบลาสโตซิสต์ (Day 5-6) ได้ จึงเป็นตัวอ่อนที่ผ่านการคัดสรรจากธรรมชาติมาระดับหนึ่งแล้ว
Powered By MakeWebEasy Logo MakeWebEasy